質(zhì)譜法檢測水中丙烯酰胺的步驟

  質(zhì)譜法檢測水中丙烯酰胺的原理是將水樣經(jīng)0.22um濾膜過濾后直接進(jìn)樣，經(jīng)液相色譜儀分離后進(jìn)入串聯(lián)質(zhì)譜儀，采用多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）模式，根據(jù)保留時(shí)間和特征離子峰進(jìn)行定性分析，內(nèi)標(biāo)法定量分析。該方法檢出限為0.036ug/L，測定下限為0.15ug/L。

檢測試劑

1.一次性針頭過濾器：0.22um，聚四氟乙烯（PTFE）材質(zhì)。

2.一次性注射器：2.5mL。

3.高純水：水質(zhì)應(yīng)滿足GB/T33087的規(guī)定。

4.甲醇：色譜純。

5.載氣：高純氮，純度≥99.999%。

6.丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液：1000mg/L，溶劑為甲醇，有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

7.丙烯酰胺同位素（D3-丙烯酰胺）標(biāo)準(zhǔn)溶液：1000mg/L，溶劑為甲醇，有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

8.丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)貯備液：10.0mg/L。

取1.00mL丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，用甲醇稀釋并定容至100mL，配制10.0mg/L丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)貯備液。于4℃以下冷藏密封避光保存。

9.D3-丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)貯備液：10.0mg/L。

取1.00mLD3-丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，用甲醇稀釋并定容至100mL，配制10.0mg/LD3-丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)貯備液。于4℃以下冷藏密封避光保存。

10.丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)使用液：10.0ug/L。

取100uL丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)貯備液，用高純水稀釋并定容至100mL，配制10.0ug/L丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)使用液。

11.D3-丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)使用液：10.0ug/L。

取100uLD3-丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)貯備液，用高純水稀釋并定容至100mL，配制10.0ug/LD3-丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)使用液。

檢測所需儀器

1.液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源。

2.色譜柱：C18色譜柱或其他性能等效的色譜柱。

3.樣品瓶：2mL。

4.容量瓶：100mL和10mL。

5.采樣瓶：棕色玻璃瓶，具玻璃塞。

6.微量注射器：1000uL。

水樣采集保存方法

  水樣采集后在4 ℃以下冷藏保存，24 h內(nèi)完成水樣過濾處理并上機(jī)測試。若水樣中存在殘留氯，加入抗壞血酸去除余氯。

水樣制備

   水樣經(jīng)一次性針頭過濾器過濾，取水樣于10mL容量瓶中，加入400uLD3-丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)使用液，用水樣定容至刻度。置于進(jìn)樣瓶中，待測。如水樣濃度較高或基體復(fù)雜，可將水樣適當(dāng)稀釋后，再經(jīng)過一次性針頭過濾器過濾。

用實(shí)驗(yàn)室一級純水代替樣品，按照與試樣制備相同的步驟制備空白試樣。

檢測步驟

色譜分析條件

1. 流動(dòng)相：A相——甲醇，B相——水，A:B=10:90（V:V），等度洗脫。

2. 流速：0.3 mL/min。

3. 柱溫：30 ℃。

4. 進(jìn)樣體積：10uL。

質(zhì)譜分析條件

1. 離子源：電噴霧離子源，正離子模式。

2. 離子源溫度：350 ℃。

3. 掃描方式：MRM，多反應(yīng)監(jiān)測條件參照下圖

校準(zhǔn)曲線的繪制

1. 本方法使用內(nèi)標(biāo)法定量。

2. 校準(zhǔn)系列的配制：取5個(gè)10 mL容量瓶，用微量注射器依次準(zhǔn)確加入200uL、500uL、1 000uL、1 500uL和2 000uL丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)使用液及400uL D3-丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)使用液，用高純水定容至刻度，配制濃度為0.20ug/L、0.50ug/L、1.00ug/L、1.50ug/L和2.00ug/L的校準(zhǔn)曲線系列。現(xiàn)用現(xiàn)配。

3. 按照質(zhì)量濃度從低到高依次進(jìn)樣，以標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中目標(biāo)組分的濃度與內(nèi)標(biāo)物濃度的比值為橫坐標(biāo)，以其對應(yīng)的峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值為縱坐標(biāo)，建立校準(zhǔn)曲線。

水樣檢測

1. 采用自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣，進(jìn)樣量為10uL。

2. 按照與校準(zhǔn)曲線的繪制相同的步驟進(jìn)行試樣的測定。

3. 丙烯酰胺和D3-丙烯酰胺MRM色譜圖見相關(guān)圖表所示。

 

定性結(jié)果

  根據(jù)丙烯酰胺和D3-丙烯酰胺MRM色譜圖中的保留時(shí)間和特征離子對進(jìn)行定性分析。

定量結(jié)果

  根據(jù)計(jì)算公式計(jì)算樣品中組分的含量，結(jié)果以微克每升（ug/L）表示。丙烯酰胺的定量離子對為72.1＞55.1，D3-丙烯酰胺的定量離子對為75＞58。測定結(jié)果位數(shù)的保留與測定下限一致，最多保留三位有效數(shù)字。

以上內(nèi)容來源于《DB37/T 4145—2020 水質(zhì) 丙烯酰胺的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》